斜面培养基,配置斜面培养基作用是什么试管为什么要加塞棉塞
来源:整理 编辑:好学习 2023-11-04 19:09:59
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1,配置斜面培养基作用是什么试管为什么要加塞棉塞
斜面培养基主要是用来作为接种的载体斜面比非斜面的面积大,可接种的面积也大加棉塞是为了防止杂菌的污染!搜一下:配置斜面培养基作用是什么?试管为什么要加塞棉塞?
2,斜面培养基有怎么用
斜面培养基 你见过吧. 在试管里的那个. 你想把他立起来和倒下哪个培养基的表面积大?
用途是密闭效果比平面的好很多,能用来做细菌的长期保存,平面的就不行 时间一长全是杂菌 没法用了
所以 之所以斜面 只是要增大培养基表面积 呵呵 就这么简单
3,种子培养为什么是斜面培养基
很简单,就是因为试管中的斜面比平面有更大的表面积,易于实现菌种的小范围扩大培养。但斜面培养基进行种子培养时也有很大的局限性,如扩大范围小等。所以一般只作为纯培养保藏菌种的活化和初次转接等。同时,与平板相比,斜面培养基面积仍比较小,只适合于纯种培养,不适合混合菌种的分离培养。
4,lb斜面固体培养基
在对大肠杆菌进行扩大培养时选择LB液体培养基. 即在含3mlLB液体培养基的20ml试管中加入30ul甘油菌种,37度,180转/分,过夜.次日,将此得到的菌液全部加入含300ml LB液体培养基的三角烧瓶中,200转/分,摇3个小时. 故选:A.胰化蛋白胨的品质更好,价格贵点。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。
而lb培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。
两者都属于半合成培养基。肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和nacl。而lb培养基的主要成分是胰化蛋白胨、酵母提取物和nacl。
5,斜面培养基怎样能制作简便点
制备斜面培养基有一种简捷快速的方法:1、将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用.2、在并排5支试管上面平置截好的胶合板,再在胶合板上面并排放5支试管,然后将试管的上、下端分别用牛皮纸包好,用线扎紧,使胶合板两侧的试管保持平行,置高压锅中灭菌.3、高压灭菌后,经自然冷却,待气压降至零时,将高压锅的锅盖打开点,当棉塞水分充分蒸发后取出,不用拆捆,直接摆成斜面.大量制斜面时,既快捷又很少占用空间,非常方便,还便于保温,减缓凝结速度,充分吸收游离水分.4、如需将斜面培养基保存一段时间,可在灭菌前将聚丙烯塑料袋套在试管外并扎紧袋口,灭菌后取出,直接摆成斜面,可防止水分蒸发.制作培养基斜面,比较传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面
6,固体斜面培养基配制步骤和注意事项有哪些
1、培养基配方的选定
同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。
2、培养基的制备记录
每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。
3、培养基成分的称取
培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
4、培养基各成份的混合和溶化
培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢莴加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。
5、培养基pH的初步调正
因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行PH的初步调正。例如,牛肉浸液约可降低pH0.2,而肠浸液pH却会有显著的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终PH,保证培养基的质量。PH调整后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。
6、培养基的过滤澄清
液体培养基必须绝对澄清,琼脂培养基也应透明无显著沉淀,因此 ,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。
琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去,再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至55~60°C的培养基放入大的三角烧瓶内,装入量不得超过烧瓶容量的1/2,每1000ml培养基加入1~2个鸡蛋的蛋白,强力振摇3~5分钟,置高压蒸汽灭菌器中、121°C加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。
7、培养基的分装
培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基最终pH之用。
8、培养基的灭菌
一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。
某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。
琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出,冷至55℃-60℃时,摆置成适当斜面,待其自然凝固。
9、培养基的质量测试
每批培养基制备好以后,应仔细检查一遍,如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。
将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。
用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基,培养24~48小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。
10、培养基的保存
培养基应存放于冷暗处,最好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。
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斜面培养 培养 培养基 配置 斜面培养基
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